RTS-MMLV逆转录酶
Catalogue No.
- Cas
- 本产品可提高全长 cDNA 产量，使其具有更完整的 cDNA基因代表性。合成的 cDNA 稳定性强，可以有效避免不恰当的逆转录（RT）反应而造成的cDNA产量降低，影响反应的灵敏性；或者形成缩短的cDNA，而产生假阴性结果。本RTS-MMLV逆转录酶在50℃下，具有更高的热稳定性和更长的半衰期，有效避免了目前大多数逆转录酶RNA酶H活性高、热稳定性差，无法稳定地利用起始RNA，生成具有完整基因代表性的cDNA的问题。
储存条件：
常温运输， -20℃±5℃保存，有效期5年。
产品内容：
名称 | 规格 | 备注 | |
RTS MMLV逆转录酶(200U/μl) | 1.0mL/管 | 25mL/瓶 | |
运输条件 | 常温 | — | |
储存条件 | 2-8℃保存1月， -20℃保存3年 | — | |
1. PCR反应体系设置(以25μl反应体系为例)
组分 | 使用量(微升) | 备注 |
5×RT-PCR buffer | 5.0 | 各组分使用量可根据PCR扩增体系的变化而调整 |
dNTP(10mM) | 0.50 | |
正向引物（40μM） | 0.25 | |
反向引物（40μM） | 0.25 | |
探针（4μM） | 0.15 | |
RTS MMLV逆转录酶(200U/μl) | 0.40 | |
RTS-Taq DNA聚合酶（2.5U/μl） | 1.0 | |
无核酸酶水 | 7.45 | |
Template DNA | 10.0 |
2. PCR扩增条件设置
以100-300bp大小扩增片段为例
步骤 | 温度 | 时间 | 循环 |
1 | 50℃ | 5-15 min | 1 |
2 | 95℃ | 2 min | 1 |
3 | 95℃ | 5s | 40※ |
4 | 55-60℃ | 10-30s（采集荧光） |
※注：反应条件根据引物探针和模板情况可自行设置。